Аурамін О — діарилметановий барвник, який використовується як флуоресцентна пляма. У чистому вигляді урамін O виглядає як жовті голчасті кристали. Він нерозчинний у воді та розчинний у етанолі та ДМСО.
Родамін аурамінове фарбування використовується для виявлення мікобактерій безпосередньо з клінічних зразків. Барвник зв'язується з міколевими кислотами і флуоресціює під ультрафіолетом. Кислотостійкі організми (мікобактерії) будуть виглядати жовтими або оранжевими під ультрафіолетовим світлом.
Аурамін-фенольна фарба Мазки фарбували аурамінфенолом протягом 10 хв. Потім мазки промивали водою та знебарвлювали 3% кислим спиртом (0,5% HCl у 70% етанолі) протягом 2 хвилин. Потім слайди промивали у водопровідній воді та контрастно фарбували 0,1% водним розчином перманганату калію протягом 2 хвилин.
Процедура
- Помістіть «фіксований» мазок на підставку для фарбування та залийте предметне скло родамін-аураміном на 15 хвилин. …
- Змийте пляму дистильованою водою.
- Залийте предметне скло флуоресцентним знебарвлювачем протягом 2-3 хвилин.
- Ретельно промити дистильованою водою.
- Залийте предметне скло перманганатом калію на 3-4 хв.
Інтерпретація результатів Фарба Auramine O буде зв'язуватися з мікобактеріями, які виглядають як яскраві жовтувато-зелені стрижні, що світяться на темному тлі. Мікобактерії мають довжину приблизно від 1 до 10 мкм і зазвичай виглядають як тонкі палички. Однак вони також можуть виглядати вигнутими або зігнутими, коккобацилярними або ниткоподібними.
Аурамін О можна використовувати для фарбування кислотостійких бактерій (наприклад, Mycobacterium, де вона зв’язується з міколевою кислотою в її клітинній стінці) у спосіб, подібний до фарбування за Цилем–Нільсеном. Його також можна використовувати як флуоресцентну версію реактиву Шиффа.