Це єдина праймерна реакція дає можливість ампліфікувати та клонувати ділянку ДНК невідомої послідовності, яка є суміжною з відомою послідовністю ДНК. Один із описаних тут продуктів реакції окремого праймера включав послідовність 5'-сторони кодуючої області гена рецептора серотоніну, яка містила функціональний промотор.
опис. ПЛР з одним праймером дозволяє проводити ампліфікацію від відомих до невідомих ділянок у хромосомах, фагах, плазмідах, великих продуктах ПЛР та інших джерелах ДНК.
Незалежна від послідовності ампліфікація з одним праймером (SISPA). методика, ініційована праймером, яка вимагає модифікації цільової послідовності для досягнення неселективної логарифмічної ампліфікації гетерогенних популяцій ДНК.
Якщо використовується лише один праймер, процес називається «асиметрична ПЛР». Тільки один ланцюг дволанцюгової ДНК буде ампліфікований, і лише одна нова копія синтезується за цикл, який не може досягти експоненціальної ампліфікації..
Дизайн грунтовки для ПЛР
- Довжина 18-24 основ.
- Вміст G/C 40-60%.
- Почніть і закінчіть 1-2 парами G/C.
- Температура плавлення (Тпл) 50-60°С.
- Пари праймерів повинні мати Tm в межах 5°C один від одного.
- Пари праймерів не повинні мати комплементарних областей.
Використовуючи два праймери, ПЛР може ампліфікувати цільову послідовність ДНК в обох напрямках, що призводить до виробництва дволанцюгового продукту ДНК [??]. Цю дволанцюгову ДНК потім можна використовувати для різних застосувань, таких як секвенування, генотипування або виявлення мутацій [??] [??].