Сендвіч ІФА кількісно визначити антигени між двома шарами антитіл (тобто антитіла захоплення та виявлення). Вимірюваний антиген повинен містити принаймні два антигенних епітопи, здатних зв’язуватися з антитілом, оскільки принаймні два антитіла діють у сендвічі.
У прямому ELISA це антиген, який іммобілізується на планшеті, тоді як у сендвіч-ELISA, це антитіло захоплення, яке іммобілізується на планшеті.
Він передбачає трирівневу модель тестування: Сендвіч-тестування використовує підхід «знизу-вгору» та «зверху-внизу», при цьому цільовий шар зазвичай знаходиться посередині. Це завершено: сендвіч-тестування має розширене покриття, поєднуючи інтеграцію та модульне тестування, щоб спочатку незалежно перевірити цільовий рівень.
Виявлення та кількісна оцінка цільовий специфічний білок у сендвічі ELISA виконується за допомогою високоспецифічних антитіл, які знерухомлюють цільовий білок (антиген) на планшеті та опосередковано виявляють присутність цільового білка.
Антитіло для виявлення зв’язує антиген з іншим епітопом, ніж антитіло для захоплення. У результаті антиген «затиснутий» між двома антитілами. Афінність зв'язування антитіла з антигеном зазвичай є основним фактором, що визначає чутливість імунологічного аналізу.
Сендвіч-ELISA використовується біотехнологами в дуже дослідницьких програмах для вивчення білок-білкових взаємодій, поведінки гормонів, сигнальних шляхів, ефектів токсинів і функцій імунної відповіді.