У цьому передбачуваному тесті реагент BCIP реагує з кислою фосфатазою передміхурової залози, що є складовою сперми, утворюючи реакцію блакитного або водяного кольору. Зміна синього кольору є позитивною реакцією і вказує на наявність сперми.
BCIP (5-бром-4-хлор-3-індоліл-фосфат) використовується в поєднанні з NBT (нітросиній тетразолій) для колориметричного визначення активності лужної фосфатази. Кожен флакон BCIP постачається з флаконом NBT.
Схема реакції BCIP-NBT. BCIP гідролізується лужною фосфатазою з утворенням синього проміжного продукту. Проміжний продукт потім окислюється NBT з утворенням димеру, який є інтенсивним нерозчинним фіолетовим барвником.
BCIP/NBT (5-бром-4-хлор-3'-індоліфосфат п-толуїдинової солі/нітросинього тетразолію хлориду) використовується в комбінації як хромогенний субстрат для лужної фосфатази (ЛФ) у різних застосуваннях, включаючи WB та IHC. Реакція дає нерозчинний темно-фіолетовий/синій осад.
Плями сперми будуть флуоресціювати разом з іншими рідинами організму та різними іншими плямами. Потім ці флуоресцентні плями можна взяти тампоном і перевірити за допомогою BCIP (5-бром-4-хлор-3-індолілфосфат). BCIP реагує з кислою фосфатазою, що міститься в насінній рідині.