Протоколи підготовки компетентних клітин залежать від вибору методу трансформації—тепловий шок або електропорація. Перетворення теплового шоку також відоме як хімічне перетворення та перетворення хлориду кальцію.
1.5. Трансформація відбувається коли ДНК бактерій-донорів розщеплюється і вільні фрагменти ДНК безпосередньо поглинаються рецепторами. У результаті клітини-реципієнти набувають певних генетичних ознак від клітини-донора. Цей феномен був підтверджений у Streptococcus pneumoniae, Staphylococci та Haemophilus influenzae.
Під час трансформації бактерія поглинає фрагмент ДНК, що плаває в її оточенні. Під час трансдукції ДНК випадково переміщується вірусом від однієї бактерії до іншої. При кон'югації ДНК переноситься між бактеріями через трубку між клітинами.
Існує два основні методи трансформації бактеріальних клітин: тепловий шок і електропорація. В обох випадках бактеріальні клітини повинні бути компетентними або проникними для плазмід, які ви хочете, щоб клітина розмножувала.
Основні етапи процесу бактеріальної трансформації: Змішайте активно зростаючі бактерії з плазмідною ДНК, яку ви хочете вставити в пробірку, що містить розчин CaCl2 (хлориду кальцію). «Тепловий шок» бактерій шляхом їх швидкого нагрівання, а потім охолодження. Цей процес змушує плазміду проникати в бактерію.
У той час як еукаріоти отримують зміни в генетичному матеріалі від статевого розмноження, бактерії можуть отримати новий генетичний матеріал лише через горизонтальну передачу генів. Існує три типи горизонтального переносу генів: кон'югація, трансформація та трансдукція.