Набір для підготовки бібліотеки з низьким вмістом надає високочутливий, простий, швидкий і надійний метод для створення мультиплексованих бібліотек, придатних для секвенування наступного покоління в системах Illumina, із до 12 зразків фрагментованої дволанцюгової ДНК (dsDNA), наприклад кДНК виготовлений за допомогою SMARTer Universal Low Input RNA …
Бібліотеки готують фрагментація зразка гДНК або кДНК і лігування спеціалізованих адаптерів до обох кінців фрагмента. Ці адаптери містять повний набір сайтів гібридизації праймерів секвенування. Це усуває потребу в додаткових етапах ПЛР, роблячи процес повністю автоматизованим.
Це залежить від набору, який ви використовуєте. Якщо ви використовуєте NEBNext® Ultra™ II RNA Library Prep Kit для Illumina (E7770, плюс E7490, плюс E7335, наприклад), вам знадобиться близько 8 годин обробити відразу 8 зразків, починаючи з контрольованої якості РНК.
Огляд. Підготовка бібліотеки є першим кроком секвенування наступного покоління. Це дозволяє ДНК або кДНК прилипати до проточної комірки для секвенування та дозволяє ідентифікувати зразок. Двома поширеними методами підготовки бібліотеки є підготовка бібліотеки на основі лігування та підготовка бібліотеки на основі тегментації.
від 100 нг до 1 мкг. Стандартний протокол створення бібліотеки вимагає від 100 нг до 1 мкг загальної РНК. Існують набори для наднизького введення РНК, які починаються з 10 пг-10 нг РНК; однак відтворюваність значно зростає, починаючи з 1-2 нг.');})();(function(){window.jsl.dh('z0HsZqygM6mekPIP2KiRmAs__41','
Як правило, звичайний протокол створення бібліотеки ДНК складається з 4 кроків:
- Фрагментація ДНК.
- Кінцева репарація фрагментованої ДНК.
- Лігування адапторних послідовностей (не для секвенування однієї молекули)
- Додаткове підсилення бібліотеки.